1.Kas yra ląstelių kultūra?
Ląstelių kultūra reiškia ląstelių pašalinimą iš gyvūnų ar augalų ir jų auginimą palankioje dirbtinėje aplinkoje.Ląstelės gali būti paimtos tiesiai iš audinio ir suskaidytos fermentinėmis arba mechaninėmis priemonėmis prieš kultivavimą arba jos gali būti gautos iš nusistovėjusių ląstelių linijų ar ląstelių linijų.
2.Kas yra pirminė kultūra?
Pirminė kultūra reiškia kultivavimo etapą po to, kai ląstelės yra atskirtos nuo audinio ir atitinkamomis sąlygomis dauginasi tol, kol užima visus turimus substratus (ty susilieja).Šiame etape ląstelės turi būti subkultūros, perkeliant jas į naują talpyklą su šviežia auginimo terpe, kad būtų daugiau vietos tolesniam augimui.
2.1 Ląstelių linija
Po pirmosios subkultūros pirminė kultūra vadinama ląstelių linija arba subklonu.Ląstelių linijos, gautos iš pirminių kultūrų, turi ribotą gyvenimo trukmę (ty jos yra ribotos; žr. toliau), o kai jos praeina, dominuoja didžiausią augimo pajėgumą turinčios ląstelės, todėl populiacijoje susidaro tam tikras genotipo laipsnis, atitinkantis fenotipą.
2.2 Ląstelių padermė
Jei klonavimo ar kitu būdu iš kultūros teigiamai atrenkama ląstelių linijos subpopuliacija, ląstelių linija taptų ląstelių štamu.Ląstelių padermės paprastai įgyja papildomų genetinių pokyčių prasidėjus tėvų linijai.
3. Ribotos ir ištisinės ląstelių linijos
Normalios ląstelės paprastai dalijasi tik ribotą skaičių kartų, kol praranda gebėjimą daugintis.Tai genetiškai nulemtas įvykis, vadinamas senėjimu;šios ląstelių linijos vadinamos baigtinėmis ląstelių linijomis.Tačiau kai kurios ląstelių linijos tampa nemirtingos per procesą, vadinamą transformacija, kuri gali įvykti spontaniškai arba gali būti sukelta cheminių medžiagų ar virusų.Kai baigtinė ląstelių linija transformuojasi ir įgyja galimybę neribotą laiką dalytis, ji tampa ištisine ląstelių linija.
4.Kultūros būklė
Kiekvieno tipo ląstelių auginimo sąlygos yra labai skirtingos, tačiau dirbtinę aplinką ląstelėms auginti visada sudaro tinkamas konteineris, kuriame yra:
4.1 Substratas arba auginimo terpė, aprūpinanti esminėmis maistinėmis medžiagomis (aminorūgštimis, angliavandeniais, vitaminais, mineralais)
4.2 Augimo veiksniai
4.3 Hormonai
4.4 Dujos (O2, CO2)
4.5 Reguliuojama fizinė ir cheminė aplinka (pH, osmosinis slėgis, temperatūra)
Dauguma ląstelių priklauso nuo tvirtinimo vietos ir turi būti auginamos ant kieto arba pusiau kieto substrato (prilipusi arba vienasluoksnė kultūra), o kitos ląstelės gali augti plūduriuojančios terpėje (suspensijos kultūra).
5.Kryokonservavimas
Jei subkultūroje yra ląstelių perteklius, jas reikia apdoroti atitinkama apsaugine priemone (pvz., DMSO arba gliceroliu) ir laikyti žemesnėje nei -130°C temperatūroje (kriokonservavimas), kol prireiks.Daugiau informacijos apie subkultūrą ir ląstelių kriokonservavimą.
6.Ląstelių morfologija kultūroje
Kultūros ląstelės gali būti suskirstytos į tris pagrindines kategorijas pagal jų formą ir išvaizdą (ty morfologiją).
6.1 Fibroblastų ląstelės yra bipolinės arba daugiapolės, turi pailgą formą ir auga prisirišusios prie substrato.
6.2 Epitelio tipo ląstelės yra daugiakampės, taisyklingesnio dydžio ir yra pritvirtintos prie matricos atskirais lapais.
6.3 Į limfoblastus panašios ląstelės yra sferinės ir paprastai auga suspensijoje, neprisirišdamos prie paviršiaus.
7.Ląstelių kultūros taikymas
Ląstelių kultūra yra viena iš pagrindinių ląstelių ir molekulinės biologijos priemonių.Tai puiki pavyzdinė sistema, leidžianti tirti normalią ląstelių fiziologiją ir biochemiją (pvz., medžiagų apykaitos tyrimus, senėjimą), vaistų ir toksinių junginių poveikį ląstelėms, mutagenezę ir kancerogeninį poveikį.Jis taip pat naudojamas vaistų atrankai ir kūrimui bei didelio masto biologinių junginių (tokių kaip vakcinos, gydomieji baltymai) gamybai.Pagrindinis privalumas naudojant ląstelių kultūrą bet kuriai iš šių programų yra rezultatų, kuriuos galima gauti naudojant klonuotų ląstelių partiją, nuoseklumas ir atkuriamumas.
Paskelbimo laikas: 2019-03-03