1. Tinkamos ląstelių linijos pasirinkimas
Rinkdamiesi eksperimentui tinkamą ląstelių liniją, atsižvelkite į šiuos kriterijus:
a.Rūšis: Nežmonių ir ne primatų ląstelių linijos paprastai turi mažiau biologinės saugos apribojimų, bet galiausiai jūsų eksperimentas nustatys, ar naudoti tam tikros rūšies kultūrą.
b. Savybės: koks jūsų eksperimento tikslas?Pavyzdžiui, ląstelių linijos, gautos iš kepenų ir inkstų, gali būti tinkamesnės toksiškumo tyrimams.
c.Ribotos arba nenutrūkstamos: nors renkantis iš ribotos ląstelių linijos gali būti daugiau galimybių išreikšti tinkamą funkciją, ištisines ląstelių linijas paprastai lengviau klonuoti ir prižiūrėti.
d. Normalios arba transformuotos: transformuotų ląstelių linijos paprastai turi didesnį augimo greitį ir didesnį sėjimo efektyvumą, yra nenutrūkstamos ir reikalauja mažiau serumo auginimo terpėje, tačiau jų fenotipas nuolat pasikeitė dėl genetinės transformacijos.
e. Augimo sąlygos ir ypatybės: Kokie yra jūsų augimo greičio, prisotinimo tankio, klonavimo efektyvumo ir suspensijos augimo galimybės reikalavimai?Pavyzdžiui, norint ekspresuoti rekombinantinius baltymus dideliu derliumi, gali tekti pasirinkti ląstelių linijas, kurios turi greitą augimo greitį ir gebėjimą augti suspensijoje.
f. Kiti kriterijai: jei naudojate ribotą ląstelių liniją, ar yra pakankamai atsargų?Ar ląstelių linija yra visiškai apibūdinta, ar turite tai patikrinti patys?Jei naudojate nenormalią ląstelių liniją, ar yra lygiavertė normali ląstelių linija, kurią galima naudoti kaip kontrolę?Ar ląstelių linija yra stabili?Jei ne, kaip lengva jį klonuoti ir sukurti pakankamai šaldytų atsargų jūsų eksperimentui?
2.Gaukite ląstelių linijas
Galite sukurti savo kultūrą iš pirminių ląstelių arba galite pasirinkti pirkti nusistovėjusias ląstelių kultūras iš komercinių ar ne pelno tiekėjų (ty ląstelių bankų).Gerbiami tiekėjai tiekia aukštos kokybės ląstelių linijas, kurios buvo kruopščiai patikrintos dėl vientisumo ir užtikrina, kad kultūroje nėra teršalų.Rekomenduojame neskolinti kultūrų iš kitų laboratorijų, nes jos turi didelę ląstelių kultūrų užteršimo riziką.Nepriklausomai nuo jo šaltinio, prieš pradėdami naudoti, įsitikinkite, kad visos naujos ląstelių linijos buvo ištirtos dėl užteršimo mikoplazma.
Paskelbimo laikas: 2023-01-01